O enrolamento da folha da videira ("grapevine leafroll") é uma doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos, Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas no Estado de São Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na 'Cardinal', que apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 no Brasil.

Grapevine leafroll is a complex disease that can be caused by any one of the nine serologically distinct closteroviruses, referred to as Grapevine leafroll-associated viruses 1 to 9 (GLRaV-1 to GLRaV-9). So far, it has been known the occurrence of GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 and GLRaV-6 in Brazil. This work reports the identification of GLRaV-5 in leafroll-infected grape material from the State of São Paulo, by Biotine-ELISA. The virus was detected with low incidence in tested grape cultivars, except in 'Cardinal', which showed 100% infected. This is the first report of GLRaV-5 in Brazil.

Em São Paulo, existem dois isolados do Grapevine virus B (GVB), sorologicamente semelhantes e sintomatologicamente distintos, que causam a doença denominada fendilhamento cortical ("grapevine corky bark", GCB). Na literatura estrangeira existem relatos de que o GVB pode ser transmitido por cochonilhas brancas. O objetivo do presente trabalho foi o de verificar a transmissibilidade do GVB de videira infectada para videira sadia através da cochonilha da espécie Pseudococcus longispinus. Os dois isolados do vírus foram testados: o isolado comum (GVB-C) e o isolado Itália (GVB-I). A confirmação de infecção foi feita através da análise visual de sintomas, ELISA e RT-PCR. Em todos os testes de inoculação experimental, os primeiros sintomas da virose foram notados com, aproximadamente, 8 a 12 meses após a exposição às cochonilhas. Plantas sadias da variedade LN-33, mantidas ao redor de uma planta infectada com o GVB-C e altamente infestada pela P. longispinus, tornaram-se infectadas com incidência de 54,2%, após 4 anos. Empregando-se inoculação experimental com cochonilhas virulíferas, plantas da indicadora LN-33 apresentaram infecção de 46,2% e 40,0% para o GVB-C e GVB-I, respectivamente, após 3 anos de observações. Apesar desta espéciede cochonilhaocorrer de maneira eventual nos vinhedos do Estado de São Paulo, precauções devem ser tomadas em áreas onde são mantidos clones sadios de variedades de copa e de porta-enxerto de videira, visto que esses insetos, além de possuírem grande número de plantas hospedeiras, também podem transmitir outros importantes vírus da videira.

In the State of São Paulo, Brazil, there are two isolates of Grapevine virus B (GVB) associated with grapevine corky bark disease (GCB). Although serologically similar, they induce distinct reaction on some grape varieties. They are called GVB-C for common isolate and GVB-I for isolate obtained from the variety Italia. The objective of this work was to verify the transmission of both GVB isolates from infected to healthy plants by the mealybug Pseudococcus longispinus. The transmission of the virus was determined by visual analysis of symptoms, ELISA and RT-PCR. In all transmission experiments, grape indicator plants that had been exposed to presumably viruliferous mealybugs reacted in 8-12 months with a typical symptoms of GCB. Healthy LN-33 plants, maintained around one GCB-C affected LN-33 plant, highly infested by the mealybug, became infected with incidence of 54.2% after four years. Experimental inoculation of healthy LN-33 plants with viruliferous mealybugs resulted in infection rates of 46.2% for GVB-C and 40.0% for GVB-I, after three years. Although P. longispinus occurs eventually in São Paulo State vineyards, preventive control measures for this insect must be taken on areas where healthy clones of scion and rootstock varieties are maintained.

O vírus A da videira (Grapevine virus A, GVA) e o vírus B da videira (Grapevirus virus B, GVB) estão associados à acanaladura do lenho de Kober ("Kober stem grooving") e ao fendilhamento cortical da videira ("grapevine corky bark"), respectivamente. Este trabalho descreve o uso de sondas moleculares de cDNA na detecção de isolados do GVA (GVA-SP) e do GVB (GVB-C-SP e GVB-I-SP) em videiras (Vitis spp.) e fumo (Nicotiana occidentalis). As sondas marcadas com digoxigenina foram produzidas por RT-PCR utilizando oligonucleotídeos específicos para os genes da proteína capsidial. Os RNA totais foram extraídos de 45 plantas de diversas variedades de videira e de 13 plantas de fumo inoculadas mecanicamente com o GVB. Os RNA extraídos das plantas infetadas, indexadas biologicamente, hibridizaram com as sondas, não se verificando reação com plantas sadias. Para confirmar os resultados de hibridização, foram também feitos testes de RT-PCR. A utilização de hibridização "dot-blot" com sondas de cDNA mostrou-se eficaz na detecção dos vírus com especificidade e sensibilidade, ressaltando-se que, preferencialmente, folhas maduras e ramos dormentes devem ser utilizados nos testes diagnósticos para o GVB e GVA, respectivamente.

Grapevine virus A (GVA) and Grapevine virus B (GVB) are involved in the Kober stem grooving and grapevine corky bark diseases, respectively. This work reports the molecular detection of isolates of GVA (GVA-SP) and GVB (GVB-C-SP and GVB-I-SP) in grapevines (Vitis spp.) and tobacco (Nicotiana occidentalis) by non-radioactive molecular probes. The digoxigenin-labeled probes were generated by RT-PCR using specific primers to the coat protein genes. Total RNA was extracted from 45 plants of several grapevine varieties and from 13 plants of tobacco mechanically inoculated with GVB. The RNA extracted from infected plants, considered infected by biological indexing, reacted to the cDNA probes while there was no hybridization with healthy plants. These results were also confirmed by RT-PCR experiments. The use of the cDNA probes hybridization was proved to be efficient in detecting both GVA and GVB with high specificity and sensitivity. However, mature leaves and dormant cuttings should be preferably used in diagnostic tests of GVB and GVA, respectively.

O presente trabalho caracteriza o gene codificador da proteína capsidial do isolado do Grapevine virus A (GVA) encontrado no Estado de São Paulo (GVA-SP). RNA total foi extraído de folhas e pecíolos de plantas de videira (Vitis spp.) da variedade 'Kober 5BB' e submetido a RT-PCR usando oligonucleotídeos desenhados para amplificar um fragmento entre as posições 6409 e 7175 do RNA do GVA ("GenBank", acesso X75433). Foi obtido um fragmento de tamanho esperado (767 nt) que inclui o gene da proteína capsidial, codificando 198 aminoácidos. A seqüência do GVA-SP apresentou similaridade de nucleotídeos e aminoácidos de, respectivamente, 86-92,3% e 94,5-98% com isolados do GVA da Europa, África e Japão (Acessos X75433, AF441234, AF007415, AB039841) e da região Sul do Brasil (Acesso AF494187), sendo, entretanto, mais similar aos isolados africano e italiano.

We report the characterization of the coat protein gene of a Brazilian isolate of Grapevine virus A (GVA-SP). Total RNA was extracted from leaves and petioles of GVA infected plants of the grape (Vitis spp.) variety 'Kober 5BB' and subjected to RT-PCR using primers designed to amplify a fragment between positions 6409 and 7175 of the GVA RNA (GenBank Accession X75433). A fragment of the expected size (767 nt) was obtained which included the coat protein gene coding for 198 amino acids. The GVA-SP sequence displayed nucleotide and amino acid similarity of, respectively, 86-92.3% and 94.5-98% with GVA isolates from Europe, Africa and Japan (Accessions X75433, AF441234, AF007415, AB039841) and Southern Brazil (Accession AF494187). The highest identity, however, was with the African and Italian isolates.

Em São Paulo, ocorrem quatro isolados do vírus que induz o mosaico das nervuras da videira (Vitis spp.), os quais são diferenciados pelos sintomas que provocam em algumas variedades. Para confirmar a identidade desse vírus e o relacionamento existente entre os quatro isolados, foram aplicados os testes DAS-ELISA e TAS-ELISA usando anti-soros comerciais contra o Grapevine fleckvirus (GFkV). As fontes de antígeno foram tecidos de floema de ramos dormentes e de folhas jovens da brotação de primavera de videiras sabidamente infetadas. As reações nos testes imuno-enzimáticos envolvendo os quatro isolados do vírus foram positivas para o anti-soro contra o GFkV. Os resultados foram também positivos para amostras de 66 plantas infetadas de 26 variedades de videira procedentes de 11 regiões vitícolas de São Paulo e de 24 plantas de 12 variedades provenientes dos estados de Minas Gerais, Paraná, Pernambuco, Rio Grande do Norte e Santa Catarina. Extratos de folhas novas e tenras apresentaram valores de absorbância mais consistentes do que extratos de ramos dormentes. Plantas não infetadas foram empregadas como controle negativo. Os resultados obtidos confirmaram que os quatro isolados virais possuem relacionamento sorológico com o GFkV, sugerindo que os mesmos pertencem ao complexo viral que causa o "grapevine fleck disease".

In the State of São Paulo, four different isolates of the virus that induces chlorotic translucent vein break in the minor veins of grapevines (Vitis spp.) were separated by their differential biological behaviour and tested for their relationship to Grapevine fleck virus (GFkV) by DAS-ELISA and TAS-ELISA with commercial antisera against GFkV. Young leaves from spring shoots and dormant cuttings were used for antigen extraction. All infected plants were previously indexed by graft-inoculation to 'Rupestris du Lot'. The four isolates gave positive reactions to the GFkV antiserum. Positive ELISA reactions were observed in 66 samples of 26 varieties, from 11 grape-growing areas from the State of São Paulo as well as 24 samples, of 12 varieties, from five other states of Brazil. Healthy plants consistently gave negative results. Young leaves were better sources of antigen than cortical scrapings of dormant cuttings. The results showed that the four isolates have a serological relationship with the GFkV, suggesting that they belong to the viral complex that induce grapevine fleck disease.

Análises citopatológicas do vírus do enrolamento da folha da videira 3 (Grapevine leafroll-associated virus 3, GLRaV-3), gênero Vitivirus foram feitas utilizando-se tecido caloso obtido in vitro, para investigar seu uso no estudo do vírus associado ao enrolamento da folha da videira (EFV). Secções ultrafinas foram feitas a partir de cultura de calos obtidos de hastes e brotos de videiras (Vitis spp.) infetadas pelo GLRaV-3. Dois tipos de calos foram observados. Um tipo transparente composto de células grandes e altamente vacuoladas contendo uma fina camada de citoplasma. Um outro tipo, de coloração marrom, composto de um grupo de células pequenas, compactamente arranjadas, cujo citoplasma era bem mais abundante. Nestas células foram observadas, em maior aumento, massas formadas por fibras flexuosas com 10-12 nm de diâmetro, cujo aspecto corresponde ao das partículas de closterovírus em cortes de tecido. Grupos de vesículas também foram observados, com tamanhos variando entre 50-200 nm, formadas por uma única membrana e contendo material fibrilar muito fino, característico de infecções causadas por closterovírus. A concentração do vírus foi monitorada por testes de Immunosorbent electron microscopy (ISEM), os quais mostraram que a cultura de calos obtidos de videiras infetadas pôde ser usada para estudar os vírus associados ao EFV durante várias gerações, apesar da diminuição da concentração de vírus após repetidas transferências. Não foram observadas partículas de vírus em tecido caloso obtidos de videiras sadias.

The cytopathology of grapevine (Vitis spp.) callus tissue infected with Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), genus Vitivirus was studied in order to investigate the usefulness of callus cultures to study grapevine leafroll-associated viruses. Ultrathin sections were made from in vitro callus obtained from stems and shoots of GLRaV-3 infected grapevine plants. Callus was composed of two types of tissue. Translucent, soft callus was formed and composed of large loosely arranged cells, containing big vacuoles and a thin layer of cytoplasm. Other parts of the callus were brown-coloured and composed of small compactly arranged cells, which showed flexuous and rod-shaped closterovirus-like particles, with 10-12 nm in diameter, at higher magnifications. Groups of vesicles formed by a single membrane were also observed, with sizes ranging from 50-200 nm, containing fine fibrillar material, also typical of closterovirus infections. Virus concentration was monitored by Immunosorbent electron microscopy (ISEM) tests, which showed that in vitro culture of callus tissue from grapevine infected plants, could be used to study the GLRaV viruses through many successive generations, despite the decline in virus concentration after repeated transfers. No virus particles were observed in callus tissue obtained from healthy grapevines.

Since 1991, when the whitefly Bemisia argentifolii Bellows & Perring was first described in São Paulo, it dispersed rapidly to all the regions of Brazil. Although the high incidence of geminivirus is correlated with high population of this whitefly, the transmission efficiency of this insect is unknown. To determine whether the B. argentifolii is a vector of BGMV, two experiments were carried out. After an aquisition period of 24 hours on infected beans plants cv. Carioca 80, adults of the whitefly were transferred to seedlings of some cultivars, giving a period of inoculation of 24 hours. In the 1st experiment, the percentage of symptomatic plants were: 25.0% for Carioca 80, 21.0% for Moruna 80, 21.0% for Aeté, 75.0% for Preto and 26.3% for Manteiga. In the 2nd experiment, the percentage of virus transmission were: 63.6% for IAC Carioca and 60.0% for BT-2. The results showed that B. argentifolii is a vector of BGMV and apparently there are no marked differences in efficiency of transmission between this specie and Bemisia tabaci (Genn.).

A anomalia do cultivar de videira Niagara Rosada, caracterizada por sintomas de clorose nas folhas, chocolate das bagas e cachos malformados, não é de natureza virótica, de acordo com resultados de testes de transmissão e de perpetuação. Essa anomalia, presente em áreas definidas de alguns vinhedos de Indaiatuba e Jundiaí (SP), está associada à deficiência nutricional de boro. O teor médio de boro em amostras de plantas afetadas de 'Niagara Rosada' (18 ppm no limbo e 7 ppm nos frutos) foi menor do que nas de plantas normais (24 ppm no limbo e 10 ppm nos frutos) das mesmas plantaçoes; um material coletado de um vinhedo bastante afetado mostrou 13 e 1 ppm respectivamente no limbo e nos frutos de plantas deficientes contra 20 e 6 ppm nos de plantas sem sintomas. Amostras de três vinhedos vizinhos sem essa anomalia apresentaram um teor médio de 35 ppm no limbo. As do porta-enxerto 'Traviú' com clorose e sem clorose mostraram 16 ppm e 43 ppm de boro respectivamente. A aplicação de bórax, nas doses de 5, 10 e 20g por planta, 1ogo após a poda de inverno, ou pulverização de ácido bórico nas concentraçoes de 0,3% e 0,6% sobre a folhagem, durante o início do florescimento e durante a fase de uva chumbinho, permitiram controlar a anomalia nas condições de campo. Foi notada resposta favorável por um ciclo vegetativo, pelo menos, indicando controle por efeito residual de uma aplicação.

The 'pink Niagara' grape (V. labrusca L. x V. vinifera L.) anomaly characterized by leaf chlorosis and "chocolate" (internal browning) of the young fruit, at first thought to be a virus disease, has been found to be a result of boron deficiency. The anomaly was first recorded in 1974. It occurs in patches in vineyards of Indaiatuba and Jundiaí, two grape-growing counties of the State of São Paulo, Brazil. Affected plants show yellowing between the primary and secondary veins of the upper leaves and malformed clusters, with normal-sized berries and small ones. Some small fruits are slightly elongated and show dark areas on the skin; many have dark brown pulp, easily visible when they are still green. Severely affected plants become stunted. Chemical analysis showed a lower boron content in the affected plants (18 ppm in the leaf blades and 7 ppm in the fruit) than in normal ones (24 ppm in the leaf blades and 10 ppm in the fruit). Leaf samples from three nearby vineyards without the anomaly presented a boron content of 35 ppm. Leaf blades from abnormal and normal 'Traviú' rootstocks (V. riparia Michaux. x V. rupestris Scheele x V. cordifolia Michaux., '106-8') had 16 ppm and 43 ppm B, respectively. An efficient control of the anomaly was got with borax, applied after prunning to affected plants at the rates of 5, 10 and 20 g per plant, or with boric acid at the concentrations of 0.3 and 0.6%a sprayed at flowering and when the fruits were small. There was a residual effect of the treatment on the anomaly for at least one more season.

Estudou-se em condições de casa de vegetação, a ação de três adubos foliares comerciais (Rhodia, Colombina e Wuxal) em três cultivares de feijoeiro (Carioca, Rosinha e Goiano). As plantas receberam três aplicações dos produtos, respectivamente, 10, 25 e dias após a emergência. Foi determinado o efeito dos tratamentos no desenvolvimento e na produtividade das plantas. Verificou-se que os cultivares comportaram-se similarmente quanto aos parâmetros analisados, não ocorrendo interações significativas com os adubos utilizados. Apesar da redução na altura das plantas tratadas com Wuxal, a análise dos resultados referentes ao número de vagens e sementes, além do peso de sementes, não revelou efeito significativo da aplicação de Rhodia 0,2 ml/l, Colombina 3,0 ml/l e Wuxal 2,5 ml/l sobre os parâmetros estudados.

This research deals with the effects of the application of three foliar fertilizers (Rhodia, Colombina and Wuxal)on growth and productivity of three beans cultivars (Carioca, Rosinha and Goiano), under greenhouse conditions. Plants growing in pots received three applications of the products at 10, 25 and 40 days after germination. Similar behavior was observed with the three cultivars. It was observed reduction in plant lenght treated with Wuxal, but no significant differences were found between the treatment with Rhodia 0,2 ml/l, Colombina 3 ml/l and Wuxal 2,5 ml/l on number of pods, number of seeds and seeds production.

Verificou-se o efeito do cloreto de (2-cloroetil) trimetilamônio, quando aplicado em pulverização das plântulas, no desenvolvimento do algodoeiro cultivar 'IAC-RM3' , em condições de casa-de-vegetação. Estudaram-se as concentrações de 0, 20, 200 e 2000 ppm do retardador de crescimento; sendo que os tratamentos diminuíram a altura e o incremento percentual da mesma, com relação ao controle. Pela análise de crescimento verificou-se que a TAL, a TCR e a RAF apresentaram valores decrescentes com relação ao aumento da concentração do regulador de crescimento aplicado.

Seedlings of cotton were treated 15 days after germination, with (2-chloroethyl) trimethylammonium chloride (CCC) at concentrations of 20, 200 and 2,000 ppm and the check to verify the effect of the compound on the growth of the plant. The experiment was done under greenhouse conditions in 1974. The main proposal of this work is to study the variation of plant height, percentual plani variation height, net assimilation rate, relative growth rate and the leaf area ratio with application of CCC. The growth regulator promotes decrease in plant height and in percentual plant variation height, 6 and 12 days after application of CCC. CCC at concentration of 2,000 ppm causes, 12 days after spray, the inferior heights and fewer percentual variation heights in cotton plants. Application of CCC at concentrations of 20, 200 and 2,000 ppm, promotes proportional diminutions in the net assimilation rate, relative growth rate and in the leaf area ratio in relation to check.